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      厭氧培養箱廠家介紹一些固體厭氧培養法

      發布日期: 2019-04-19
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         厭氧培養箱廠家介紹一些固體厭氧培養法
        一、厭氧罐法
        1.厭氧罐體的結構
        目前使用的厭氧罐的罐體采用透明聚碳酸酯硬質塑料或不銹鋼制成。圓形罐蓋的周邊凹槽內嵌有橡皮圈,能使罐體和蓋密封。罐體與罐蓋之間有一個大的金屬螺旋夾,可使罐體密閉。罐體內蓋的正中下方,有個金屬絲網盒或金屬盤,用于放催化劑。
        2.厭氧罐的原理
        用物理或化學的方法把密閉容器中的氧除去,制造一個無氧環境。常用的方法是油氣換氣法和氣體發生袋法。
        抽氣換氣法:先把需厭氧培養的平板或液體瓶放入真空厭氧缸或厭氧罐中,再放入鈀粒催化劑(可使罐中的氧與氫反應生成水,除去氧)和美藍指示劑(缸中有氧時,指示劑為藍色,缸中無氧時,指示劑變無色),然后利用真空泵對真空厭氧缸或厭氧罐抽真空,再反復充入無氧的氮氣3次,后充入80%的氮氣、10%的氫氣和10%二氧化碳的混合氣體。鈀粒能夠促使混合氣體中氧反應掉,美藍指示劑顯示無色,則厭氧環境形成。鈀粒催化劑用過后,經干熱2h后可重復使用。打開觀察培養物后需重新抽氣換氣。
        該法利用化學方法造成無氧環境,簡便易行。該方法是在厭氧罐中放一個氫氣、二氧化碳氣體發生袋、催化劑、美藍指示劑。在鈀粒催化劑的作用下,罐中的氧氣和氫氣反應生成水,從而造成罐內的無氧環境。氣體發生袋是由一丸朋氫化鈉氯化鈷合劑、一丸碳酸氫鈉檸檬酸合劑及一片濾紙條組成。使用時剪去部分的一角,加入10 mL水,水沿濾紙滲到兩個試劑丸上,發生反應,產生氫氣和二氧化碳。
        使用時,加水后應立即放入罐中并密閉,即可厭氧培養。
        二、厭氧袋法
        厭氧袋是一種無毒、透明不透氣的復合塑料薄膜袋。袋中裝有產生氫氣和二氧化碳的安剖瓶1只,已還原成無色的美藍指示劑安剖瓶1只和鈀催化劑。使用時,把需培養的平皿放入厭氧袋中,用彈簧夾夾緊袋口,呈密閉狀態,先折斷氣體發生安瓿瓶,反應結束后(0.5 h左右),再折斷美藍指示劑安瓿瓶,若指示劑不顯色,則可進行培養。
        厭氧培養箱的使用注意事項:
        1.儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;
        2.開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;
        3.培養物放入必須是在操作室內達到厭氧環境后放入;
        4.如發生故障(停氣等原因)操作室內仍可保持12小時厭氧狀態(超過12小時則根據需要把培養物取出另作處理);
        5.經常注意氣路有無漏氣現象;
        6.調換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;
        7.真空泵按要求使用,定期檢查加油。
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