下呼吸道感染微生物檢驗的標(biāo)本留取和運(yùn)送的要求
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1.纖維支氣管鏡標(biāo)本的采集要求
纖維支氣管鏡可采集到感染部位的標(biāo)本，包括BAL、BS、PSB及支氣管穿刺活檢標(biāo)本，均應(yīng)由呼吸科醫(yī)師或經(jīng)培訓(xùn)醫(yī)師采集;為防止污染，應(yīng)采用吸入麻醉劑，勿從支氣管鏡的工作腔中吸取灌洗液標(biāo)本;標(biāo)本采集順序為：BS、BAL、PSB和活檢標(biāo)本，應(yīng)避免帶血。
2.痰、氣管吸出物標(biāo)本的留取
當(dāng)有下呼吸道細(xì)菌感染指征時，患者在醫(yī)護(hù)人員的指導(dǎo)下先用無菌生理鹽水漱口，可減少口腔污染菌的數(shù)量，如有假牙應(yīng)先摘掉;咳出清晨第一口深部痰，留至帶螺旋蓋的防漏無菌痰杯內(nèi)。僅當(dāng)插管患者出現(xiàn)肺炎癥狀時(如發(fā)熱或浸潤)采集氣管吸出物，因氣管在插管24 h后即有定植菌，在無肺部感染癥狀時吸痰送檢，培養(yǎng)結(jié)果往往與疾病不符。嬰幼兒和小齡兒童可吸取氣管和支氣管的分泌物，常用于診斷細(xì)菌性肺炎。
3.標(biāo)本的運(yùn)送要求
臨床采集的標(biāo)本均應(yīng)盡快送至實(shí)驗室，實(shí)驗室對來自急診、新入院患者和有創(chuàng)方法采集的標(biāo)本(如：BAL和肺活檢標(biāo)本)要盡快處理，以保證致病菌的活性，避免造成重復(fù)采集標(biāo)本。通常做細(xì)菌學(xué)檢驗的標(biāo)本應(yīng)在2 h內(nèi)(室溫)送至微生物實(shí)驗室。延誤送檢將導(dǎo)致口咽部定植菌過度生長，有臨床意義的病原菌數(shù)量減少。如需遠(yuǎn)程運(yùn)送，建議將標(biāo)本放置2-8 ℃環(huán)境(不超過24 h)，但培養(yǎng)分離到肺炎鏈球菌等苛養(yǎng)菌的機(jī)會和數(shù)量將會減少。實(shí)驗室應(yīng)在報告中對標(biāo)本延遲送檢或經(jīng)低溫冷藏予以說明，并指出可能對培養(yǎng)結(jié)果造成的影響。
4.拒收的標(biāo)本
實(shí)驗室接收標(biāo)本后，首先篩選并拒收以下不合格標(biāo)本：24 h內(nèi)重復(fù)采集的痰培養(yǎng)標(biāo)本、唾液、鼻沖洗液和分泌物、鼻孔拭子、咽部標(biāo)本、未經(jīng)保護(hù)套管收集的支氣管刷培養(yǎng)標(biāo)本及痰的厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本。除支氣管穿刺吸出物、PSB、活檢標(biāo)本、胸水或其他未經(jīng)污染的標(biāo)本外，其余類型的標(biāo)本均不適合做厭氧菌培養(yǎng)。
5.涂片革蘭染色判斷標(biāo)本的合格性
肺部感染的最常見機(jī)制是肺泡內(nèi)吸入了口咽部定植菌，培養(yǎng)方法的局限性在于敏感性低，且無法判斷分離菌是感染或定植。因此，實(shí)驗室需借助涂片革蘭染色方法評估痰標(biāo)本的質(zhì)量。此外，涂片還可提高下呼吸道感染病原學(xué)診斷的特異性和敏感性，并發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)不能生長的細(xì)菌，是既快速又低成本的方法，但需要實(shí)驗室人員的豐富經(jīng)驗。
通常標(biāo)本中上皮細(xì)胞的數(shù)量代表污染程度，白細(xì)胞內(nèi)或外的優(yōu)勢菌(非黏附在鱗狀上皮細(xì)胞上)有助于預(yù)測肺部致病菌�？山邮茏雠囵B(yǎng)的痰、支氣管吸出物標(biāo)本包括涂片革蘭染色所見：(1)<10個鱗狀上皮細(xì)胞(SEC)/低倍視野(LPF)，大量多形核白細(xì)胞(WBC>25個/LPF)，且存在肺泡巨噬細(xì)胞和柱狀上皮細(xì)胞均提示來自深部痰標(biāo)本;(2)WBC>25個/LPF，SEC<25個/LPF;(3)WBC∶SEC>10∶1，單一形態(tài)的細(xì)菌量達(dá)到3+-4+。不適合做培養(yǎng)的判斷：當(dāng)SEC>10個/LPF，提示標(biāo)本被唾液污染;還包括當(dāng)吸痰涂片未見細(xì)菌時。
6.涂片可提示與感染相關(guān)的信息
通過涂片革蘭染色，實(shí)驗室應(yīng)報告臨床提示感染的信息，雖然由兩種致病菌同時引起的感染不常見，但當(dāng)兩種形態(tài)的細(xì)菌均與白細(xì)胞相關(guān)時要報告;即使涂片未見細(xì)菌時仍有助于評價患者狀況，可能隱藏著某些特殊菌，如軍團(tuán)菌、內(nèi)源性真菌、結(jié)核分枝桿菌或其他可引起非典型肺炎的致病菌;質(zhì)量合格的標(biāo)本中，涂片有正常菌群及多種細(xì)菌(通常白細(xì)胞內(nèi)有空泡或液泡)，特別當(dāng)培養(yǎng)生長正常菌群時，報告要提示有吸入性肺炎等。
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